生物化学与分子生物学实验技术(浙江大学出版社)
生物化学与分子生物学实验技术
作者:厉朝龙
出版社:浙江大学出版社出版时间:2000-06-01
开本:16开
页数:250
生物化学与分子生物学实验技术 版权信息
- ISBN:9787308022804
- 条形码:9787308022804 ; 978-7-308-02280-4
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生物化学与分子生物学实验技术 内容简介
历朝龙主编的《生物化学与分子生物学实验技术》以生物高分子化合物――蛋白质、酶及核酸的分离和鉴定、代谢及其调控以及分子生物学基本技术为重点,介绍了生物高分子化合物的提取和纯化、结构和性质的分析方法、酶反应动力学分析、分子隆技术、电泳法、层析法等基本研究技术,并对实验相关的理论进行了比较系统的阐述。《生物化学与分子生物学实验技术》内容适应高等医学院校学生的教学需要,可作为本科生和研究生生物化学与分子生物学实验课程教材,也可供医学生物化学及分子生物学教学和科研工作者参考。
生物化学与分子生物学实验技术 目录
章 生化实验基本技术
节 分光光度法
一、紫外及可见分光光度法
二、荧光光谱分析法
第二节 层析法
一、纸层析法
二、薄层层析法
三、离子交换层析法
四、凝胶层析法
第三节 电泳法
一、电泳方法的分类
二、电泳技术的应用
第四节 离心分离法
一、原理与计算
二、制备离心技术
三、分析超离心
本章参考文献
第二章 蛋白质的分子组成、结构及理化性质分析
节 概述
一、蛋白质分子的基本概念
二、蛋白质的分离和纯化
三、蛋白质的定量
四、蛋白质纯度的鉴定
五、蛋白质分子的序列分析
第二节 实验项目
实验一蛋白质的定量测定
Ⅰ.Kjeldahl定氮法
Ⅱ.Lowry酚试剂法
Ⅲ.紫外光谱吸收法
Ⅳ.考马斯亮蓝染色法
实验二生物体液和组织蛋白质的分离和鉴定
Ⅰ.血清IgG的分离纯化(离子交换层析法)
Ⅱ.细胞色素c的制备及鉴定
实验三血清蛋白质的电泳分离
Ⅰ.醋酸纤维薄膜电泳
Ⅱ.聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳
实验四蛋白质理化性质分析
Ⅰ.等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点
Ⅱ.SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量
实验五蛋白质的分子筛层析分离及相对分子质量测定
Ⅰ.血红蛋白、DNP-鱼精蛋白混合物的分离(分子筛层析法)
Ⅱ.分子筛层析测定蛋白质相对分子质量
实验六蛋白质分子组成及末端氨基酸分析
Ⅰ.DNS法分析蛋白质氨基酸组分
Ⅱ.蛋白质及多肽的N-末端氨基酸分析(FDNB法)
Ⅲ.蛋白质及多肽的C-末端氨基酸分析(羧肽酶法)
实验七肽的N-末端测定及其顺序分析(DABITC/PITC双偶合法)
实验八固定化蛋白质的免疫生化鉴定(Western印迹)
本章参考文献
第三章 核酸的分子组成及理化性质分析
节 概述
一、核酸的分子组成与结构
二、核酸的理化性质
三、核酸的制备和含量测定
第二节 实验项目
实验九动物肝脏RNA的制备(苯酚法)
实验十小牛胸腺DNA的制备(浓盐法)
实验十一核酸的含量测定
Ⅰ.紫外吸收法测定核酸含量
Ⅱ.定磷法测定核酸含量
Ⅲ.地衣酚法测定RNA含量
Ⅳ.二苯胺显色法测定DNA含量
实验十二电泳法分离RNA和DNA
Ⅰ.琼脂糖凝胶电泳分离DNA
Ⅱ.聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离RNA
实验十三DNA碱基成分分析及含量测定
本章参考文献
第四章 酶作用及酶反应动力学分析
节 概述
一、酶反应动力学分析
二、酶的抑制作用动力学
三、影响酶反应速率的其他因素
四、酶试验
第二节 实验项目
实验十四蔗糖酶与淀粉酶作用的专一性
实验十五胰蛋白酶的亲和层析法纯化
实验十六酸性磷酸酶KM及Vmax值测定
附一、O.1N碘溶液的配制及标定
二、0.1N硫代硫酸钠溶液的配制及标定
实验十七磷酸盐及氟化钠对酸性磷酸酶的抑制作用
实验十八乳酸脱氢酶同工酶分析
本章参考文献
第五章 物质代谢及其激素调节
节 概述
一、物质代谢定义
二、研究目的、材料
三、研究方法
四、实验安排
第二节 实验项目
实验十九胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响
附Nelson-Somogyi法测定血糖浓度
实验二十饱食、饥饿及激素对肝糖元含量的影响
实验二十一三羧酸循环中间产物对酵母耗氧率的影响(Warburg氏呼吸仪示教)
附Warburg氏呼吸仪的构造和使用
实验二十二脂类的薄层层析
实验二十三酮体的生成与利用
实验二十四血清低密度脂蛋白与极低密度脂蛋白的比浊测定
附标准曲线的制作
实验二十五血清脂蛋白的醋酸纤维薄膜电泳
实验二十六转氨基作用
实验二十七血清谷丙转氨酶活性的测定(赖氏法)
实验二十八生物氧化与电子传递
本章参考文献
第六章 分子生物学基本实验技术
节 概述
一、核酸是遗传物质
二、基因与基因组
三、DNA复制、损伤与修复
四、基因表达和遗传密码
五、基因表达的调控
六、分子生物学实验技术相关知识
第二节 实验项目
实验二十九质粒DNA的提取
实验三十质粒DNA酶切及琼脂糖凝胶电泳分离鉴定
实验三十一质粒DNA的分子杂交
实验三十二mRNA的提取与纯化
实验三十三血液标本中DNA的提取
实验三十四脉冲电场凝胶电泳
实验三十五RNA分析–Northern杂交
实验三十六聚合酶链反应(PCR)技术体外扩增DNA
实验三十七反转录聚合酶链反应(RTI_PCR)
实验三十八cDNA文库的构建
实验三十九PCR-RFLP法测定CYP2C19ml等位基因
实验四十等位基因特异扩增法分析基因中单碱基突变
实验四十一利用PCR差异显示mRNA
本章参考文献
附录
一、硫酸铵饱和度计算表
二、缓冲溶液的配制
三、常见蛋白质相对分子质量参考值
四、常见蛋白质等电点参考值
五、实验误差
六、实验报告
七、实验注意事项及应急处理